След химически синтез на пептиди чрез FMOC от твърда фаза, има много методи за разцепване и сега са въведени два основни типа, които обикновено използваме.
1. Метод на силна киселина (TFA)
Сухата смола се поставя в колба на разклащане и се добавя подходящо количество чистачи, съдържащи чистачи. (Чистачи) Трифлуороцетна киселина Реагент за рязане на киселина (TFA), 10-25ml/G смола, затворена и разклатена периодично при стайна температура с въртене. Смолата се източва, промива се 2-3 пъти с нов TFA, филтратът се комбинира и 8-10 пъти повече от обема на ледения диетилов етер се спуска. Понякога някои TFA могат да бъдат задушени, за да се получат утайки от суров пептид. Ether може да се използва за повишаване на ефективността на валежите чрез охлаждане, подпомагано от лед. Накрая се събира утаеният суров пептиден продукт.
Подходяща смола: Wang смола или пързалка амид смола
2, метод на слаба киселина (разреждане на TFA или оцетна киселина) 1% TFA:
1 g смола, съдържаща пептиди, се добавя към стъклена трескава колба от дихлорометанов разтвор, съдържащ 1%TFA, запечатан и разклатен в продължение на 2 минути. Филтратът се натиска с азот в друга нова метанолна колба на шейк, съдържаща 10% пиридин, и процедурата се повтаря 10 пъти. Защитните пептиди, останали върху смолата, се промиват три пъти, като се използват 30ml DCM и 30ml MeOH. Остатъците се проверяват и почистват от TLC или HPLC. Всички филтрати се комбинират и 5% от разтворителя се готви при намалено налягане. Добавя се четиридесет мл вода и валежите се подпомагат с охлаждащата смес. След филтрация продуктът се промива три пъти с чиста вода, поставя се във вакуумна сушене на фурна и се суши с KOH или P2O5.
Разредена оцетна киселина:
Пептидите, окачени върху смолата, се обработват с разтвор на рязане в продължение на 2 часа, използвайки ACOH // TFE/DCM (2: 2: 6), смолата се филтрира и смолата се промива три пъти с режещ разтвор. Излишната оцетна киселина се отстранява чрез добавяне на 15-кратен N-хексан към смесения филтрат и въртящо се стъпка.
Приложение смола: 2-CTC смола
Време за публикация: 2025-07-01