Като инструмент с висока точност HPLC може лесно да доведе до някои проблемни малки проблеми, ако не се работи по правилния начин по време на употреба. Един от най -често срещаните проблеми е проблемът с компресията на колоната. Как бързо да отстраним неизправното хроматограф. Системата HPLC се състои главно от бутилка резервоар, помпа, инжектор, колона, температурна камера на колоната, детектор и система за обработка на данни. За цялата система стълбовете, помпите и детекторите са основните компоненти и основните места, които са предразположени към проблеми.
Ключът към налягането на колоната е областта, която се нуждае от голямо внимание при използване на HPLC. Стабилността на налягането на колоните е тясно свързана с хроматографската пикова форма, ефективността на колоните, ефективността на разделянето и времето на задържане. Стабилността на налягането на колоната не означава, че стойността на налягането е стабилна при стабилна стойност, а по -скоро, че диапазонът на колебание на налягането е между 345kpa или 50psi (което позволява използването на градиентно елуиране, когато налягането на колоната е стабилно и бавно се променя). Твърде високо или твърде ниско налягане е проблем с налягането в колоната.
Най -предразположените към HPLC повреди и решения
1, високото налягане е най -често срещаният проблем при използването на HPLC. Това означава внезапно покачване на натиска. Като цяло, има следните причини: (1) Като цяло това се дължи на блокиране на канала на потока. В този момент трябва да го разгледаме частично. a. Първо, отсечете входа на вакуумната помпа. Към този момент, надписващата тръба се напълва с течност, така че да надникне тръбата е по -малка от бутилката за разтворител, за да се види дали течността капе по желание. Ако течността не капе или капе бавно, главата на филтъра на разтворителя се блокира. Лечение: Накиснете се в 30% азотна киселина за половин час и изплакнете с ултрачиста вода. Ако течността капе на случаен принцип, главата на филтъра за разтворител е нормална и се проверява; б. Отворете клапана за прочистване, така че подвижната фаза да не преминава през колоната и ако налягането не е значително намалено, бялата глава на филтъра се блокира. Лечение: Филтрираните бели глави се отстраняват и се озвучават с 10% изопропанол в продължение на половин час. Ако приемем, че налягането пада под 100psi, филтрираната бяла глава е нормална и се проверява; c. Извадете изходния край на колоната, ако налягането не намалява, колоната е блокирана. Лечение: Ако това е буферна запушване на сол, изплакнете 95%, докато налягането е нормално. Ако запушването е причинено от по -силно запазен материал, трябва да се използва по -силен поток от настоящата подвижна фаза, за да се придвижва към нормално налягане. Ако дългосрочното налягане на почистване не намалява според горния метод, входът и изходът на колоната могат да се считат за свързани към инструмента напротив и колоната може да бъде почистена с подвижната фаза. Понастоящем, ако налягането на колоната все още не е намалено, табелата за вход на колоната може да бъде заменена само, но след като операцията не е добра, е лесно да се доведе до намаляване на ефекта на колоната, така че опитайте да използвате по -малко. За трудни проблеми може да се вземе предвид подмяната на колоните.
(2) Неправилна настройка на дебита: Правилният дебит може да бъде нулиран.
(3) Неправилно съотношение на потока: Индексът на вискозитет с различни пропорции на потоците е различен и съответното налягане на системата на потока с по -висок вискозитет също е по -голямо. Ако е възможно, разтворителите на по-нисък вискозитет могат да бъдат заменени или пренастроени и подготвени.
(4) Драйв на налягането на системата: Регулирайте нулата на сензора за ниво на течността.
2, налягането е твърде ниско (1) обикновено се причинява от изтичане на системата. Какво да направите: Намерете всяка връзка, особено интерфейсът в двата края на колоната и затегнете областта на изтичане. Извадете публикацията и затегнете или подредете PTFE филма с подходяща сила.
(2) Газът влиза в помпата, но налягането обикновено е нестабилно в този момент, високо и ниско. По -сериозно, помпата няма да може да абсорбира течността. Метод на третиране: Отворете почистващия клапан и почистете със скорост на потока 3 ~ 5ml/min. Ако не, въздушните мехурчета се аспирират на изпускателния клапан с помощта на специална тръба на иглата.
(3) Няма мобилен фазов отток: Проверете дали има мобилна фаза в бутилката на резервоара, дали мивката е потопена в подвижната фаза и дали помпата работи.
(4) Референтният клапан не е затворен: референтният клапан се затваря след забавяне. Обикновено се спуска до 0,1. ~ 0,2ml/ min след затваряне на референтния клапан.
Резюме:
В този документ се анализират само често срещани проблеми в течната хроматография. Разбира се, в нашето практическо приложение ще срещнем повече други проблеми. При обработка на грешки трябва да следваме следните принципи: Променете само един фактор в даден момент, за да определим връзката между хипотетичния фактор и проблема; Като цяло, когато подменяме части за отстраняване на неизправности, трябва да обърнем внимание на поставянето на демонтираните непокътнати части обратно на място, за да предотвратим отпадъците; Формирането на добър навик за рекорди е ключът към успеха на обработката на грешки. В заключение, когато използвате HPLC, е важно да се обърне внимание на предварителната обработка на пробата и правилната работа и поддръжка на оборудването.
Време за публикация: 2025-07-02