В биологичните изследвания обикновено се използват полипептиди с дълга последователност.За пептиди с повече от 60 аминокиселини в последователността, генната експресия и SDS-PAGE обикновено се използват за получаването им.Този метод обаче отнема много време и ефектът от отделяне на крайния продукт не е добър.
Предизвикателства и решения за дълъг пептиден синтез
При синтеза на дълги пептиди винаги се сблъскваме с проблем, тоест пространственото препятствие на реакцията на кондензация се увеличава с увеличаването на последователността в синтеза и времето за реакция трябва да се коригира, за да бъде реакцията пълна.Въпреки това, колкото по-дълго е времето за реакция, толкова повече странични ефекти се получават и се образува част от целевия пептид.Такива остатъци – дефицитни пептидни вериги са ключови примеси, произведени при дълъг пептиден синтез.Следователно, при синтеза на дълъг пептид, ключовият проблем, който трябва да преодолеем, е да изследваме висококачествените реакционни условия и реакционни методи, така че да направим реакцията на кондензация на аминокиселини по-изчерпателна и пълна.Освен това намалете времето за реакция, тъй като колкото по-дълго е времето за реакция, толкова повече са неконтролируемите странични реакции, толкова по-сложни са страничните продукти.Следователно се обобщават следните три точки:
Микровълновият синтез може да се използва: За някои аминокиселини, срещани в процеса на синтез, които не са лесни за интегриране, може да се използва микровълнов синтез.Този метод има забележителни резултати и значително намалява времето за реакция и намалява образуването на два ключови странични продукта.
Може да се използва метод на синтез на фрагменти: Когато някои пептиди са трудни за синтезиране чрез общи методи за синтез и не е лесно за пречистване, можем да приемем цялата кондензация на няколко аминокиселини в определен сегмент от пептида към пептидната верига като цяло.Този метод може също да реши много проблеми в синтеза.
Може да се използва синтез на ацилхидразид: ацилхидразидният синтез на пептиди е метод на твърдофазов синтез на N-краен Cys пептид и С-краен полипептиден хидразид химическа селективна реакция между образуването на амидни връзки за постигане на метод на пептидно свързване.Въз основа на позицията на Cys в пептидната верига, този метод разделя цялата пептидна верига на множество последователности и съответно ги синтезира.Накрая, целевият пептид се получава чрез реакция на кондензация в течна фаза.Този метод не само значително намалява времето за синтез на дълъг пептид, но също така значително повишава чистотата на крайния продукт.
Дълго пептидно пречистване
Особеността на дългите пептиди неизбежно води до сложни компоненти на суровите пептиди.Следователно също така е предизвикателство да се пречистят дълги пептиди чрез HPLC.амилоидна серия от процес на пречистване на полипептид, абсорбиращ много опит и успешно използван при пречистването на дълъг пептид.Чрез приемане на ново оборудване, смесване на множество системи за пречистване, многократно разделяне и други опитни методи, успеваемостта на дългото пептидно пречистване беше значително подобрена.
Време на публикуване: 18 април 2023 г